Cloreto de 2,3,5-trifeniltetrazólio (TTC) é um corante muito utilizado para contagem de colônias de microrganismos em meios de cultura sólidos, sendo um componente-chave do sistema de filme seco rehidratável usado para a análise microbiológica de alimentos. Esse corante é incolor na forma oxidada e vermelho quando reduzido por microrganismos, devido a formação de formazano. Nesse trabalho, TTC foi adicionado a Agar Padrão para Contagem (PCA) para enumeração de microrganismos em trinta e quatro amostras de leite pasteurizado, com o objetivo de se determinar a freqüência de microrganismos incapazes de reduzir o TTC. As amostras de leite foram submetidas a diluições decimais e a plaqueamento em profundidade em PCA com 0,015% de TTC. As colônias foram enumeradas após 24h e 48h de incubação a 35oC. De um total de 50.574 colônias, 19.665 (38,88%) não reduziram TTC em 48h. Observou-se que 571 (6,36%) colônias incolores em 24 ficaram vermelhas em 48h. Entre as colônias não redutoras de TTC, 233 foram purificadas e submetidas à coloração Gram, verificando-se que 229 (98,71%) eram cocos ou bacilos Gram positivos. Os resultados indicam que há uma elevada porcentagem de bactérias não redutoras do TTC em leite pasteurizado, e, portanto, não são detectadas quando são utilizados métodos laboratoriais baseados na formação de colônias vermelhas.
2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) is a dye largely used for enumeration of microbial colonies in solid culture media, being a key component of the dry rehydratable film system used for microbiological analysis of food. This dye is colorless in the oxidized form and red when reduced by microorganisms, due to formation of formazan. In this study, TTC was added to Plate Count Agar (PCA) for enumeration of microorganisms in thirty four pasteurized milk samples, with the aim to verify the frequency of microorganisms that are unable to reduce TTC. Milk samples were decimally diluted in saline and pour-plated in PCA plus 0.015% TTC. Colonies were counted after 24h and 48 h of incubation at 35oC. From a total of 50,574 colonies, 19,665 (38.88%) did not reduce TTC in 48h. It was observed that 571 (6.36%) colonies that were colorless in 24h became red in 48h. From those that didn't reduce TTC in 48h, 233 were purified and Gram stained. 229 (98.71%) of them were Gram positive cocci and bacilli. The results show that there is a high percentage of microorganisms unable to reduce TTC in pasteurized milk, which cannot be detected by laboratory procedures based on the formation of red colonies.
